1.目的要求。
了解測定水果和蔬菜組織中過氧化氫含量的原理和方法。
二、基本原則。
H2O2在水果和蔬菜中的積累可直接或間接導致細胞膜脂質過氧化損傷，加速細胞衰老和崩解。 然而，當被病原菌感染或受到不利的環境脅迫時，H2O2在果蔬中的快速積累參與了果蔬抗病性和抗逆性的萌發和誘導。 因此，了解H2O2在果蔬組織中的代謝具有重要意義。
H2O2與四氯化鈦（或硫酸鈦）反應形成的過氧化物-鈦絡合物的黃色沉澱物溶解在H2SO4中後，可在412nm的波長處比色測定。 在一定範圍內，色深與H2O2濃度呈線性關係。
3.材料、儀器和試劑。
a） 材料。蘋果、西紅柿、芒果、桃子等
2）儀器和器皿。
研缽，移液管，容量瓶（100ml），離心管，試管，高速冷凍離心機，分光光度計，通風櫥。
c） 試劑。1 -20 預冷丙酮
2.濃氨水。
3 2 mol l 硫酸。
取濃硫酸10ml，稀釋至90ml。
4 10%（v）四氯化鈦鹽酸溶液。
在通風的廚房中，將10ml四氯化鈦緩慢加入90ml鹽酸中。 在工作台上輕輕搖晃，使四氯化鈦完全溶解。 將試劑轉移到棕色瓶中，密閉儲存， 4.
5 100 mol L H 2 O 2 - 丙酮試劑。
將57L純度為30%的H2O2溶於再蒸餾水中，稀釋，並減小體積至100ml，得到10毫摩爾L H2O2溶液。 取本溶液1ml，溶於丙酮中，用丙酮製成體積為100ml，即為100mol L H 2 O 2-丙酮試劑。
第四，實驗程式。
a） 標準曲線的製作。
取6支試管，編號，將表18中所列試劑加入通風廚房的每個試管中，並進行相應的操作。 當加入四氯化鈦和濃氨水時，應直接加入溶液中，以減少揮發損失和管壁粘附損失。
表18 H2O2濃度的測定、標準曲線、各試劑用量及操作規程。
加入 2 mol l 硫酸後，搖動以使顆粒完全溶解。 使用管 0 作為參考零點，在 412 nm 的波長下比色測量溶液的吸光度值。 以吸光度值為縱坐標，以H2O2微摩爾數為橫坐標，製作標準曲線。
b） 提取。稱重 50 g 新鮮果蔬組織樣品，加入 50ml預冷丙酮，在通風廚房的冰浴中研磨成勻漿，以12 000 g離心，4 20分鐘，收集上清液作為樣品提取。
c） 確定。吸 10ml樣品提取物，以與標準曲線相同的方式測定。 但是，離心沉澱物需要用丙酮洗滌2或3次，直到除去顏料。 將 3. 新增到洗滌後的顆粒中0ml 2mol l硫酸，直至完全溶解用於比色測定。 重複三次。
5.實驗結果和計算。
根據溶液的吸光度值，從標準曲線檢測出相應的過氧化氫量，計算每克鮮重（fw）果蔬組織中過氧化氫的含量，以mol g fw表示。 計算公式：
式中：c——溶液中過氧化氫的量由標準曲mol求出;
v - 樣品提取總體積，ml;
vs——抽吸樣品體積，ml;
w – 樣品重量，g。
6. 注意事項。
1 也可用5%硫酸鈦代替10%四氯化鈦進行實驗。 製備四氯化鈦溶液時，一定要在通風櫥中小心小心地處理它們。
2 測定過程中滴加四氯化鈦溶液和濃氨水時，應直接加入試管中的溶液中，不要掛在牆上，然後迅速混合。
1、丙酮是一種非常危險的化工原料，閃點低，易燃易爆。 --說社會說歷史 6681
2.丙酮有腐蝕性嗎——火箭隊哈登球迷。
3.丙酮在許多化學溶劑中比較安全，不要誤導。 --林師傅，她負責。
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