1.目的要求。
1 了解斜坡上和液體、半固體介質中不同微生物培養物的特性。
2、進一步熟練掌握微生物無菌操作接種技術。
二、基本原則。
微生物的培養特性是指微生物培養物在培養基上的種群形態和生長情況。 傾斜、液體和半固體培養基通常可用於檢查不同微生物的培養特性。 它們在傾斜的培養基上培養，可以是絲狀的、明亮的、串珠狀的、稀疏的、樹突狀的或假根狀的。 它生長在液體介質中，可以是渾濁的，絮狀的，粘液狀的，形成細菌膜，上層透明，底部沉澱。在半固體培養基中穿刺培養，可以沿著接種線擴散; 或者只沿線生長; 它也可以在上層生長良好，甚至可以在一塊中生長，很少在底部生長; 或者底部長得很好，上層甚至不長。 微生物的培養特性可作為其物種鑑定的參考，並確定純培養物是否受到汙染。
在測試微生物的培養特性或進行其他微生物實驗時，接種過程必須確保它們不被其他微生物汙染，因此除了盡可能避免或減少工作環境中的各種細菌汙染外，精通各種無菌接種技術也很重要。
3.裝置。 枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、念珠菌、黴菌芽孢桿菌、粘質沙雷氏菌;
肉醬蛋白腖斜面培養基、肉膏蛋白腖液體培養基、半固體肉膏蛋白腖培養基、接種環、接種針、無菌吸管、酒精燈等。
四、操作步驟。
1 斜面接種。
1）在肉醬蛋白腖的斜試管上，用記號筆寫上接種細菌的名稱、日期和接種者。
2）點燃酒精燈或煤氣燈。
3）用拇指、食指、中指、無名指左手握住應變試管和待接種的斜試管，中指夾在兩根試管之間，使斜面朝上水平。用右手在火焰處鬆開管塞，以方便在接種過程中拔出插頭。
4）右手取接種環，用火焰燒灼燒灼，右手掌心邊緣和小指、小指、無名指分別夾在火焰邊緣的衛生棉條（或試管帽），取出，迅速燒灼噴嘴。
5）將滅菌後的接種環伸入應變試管中，先將接種環與試管內壁或無細菌生長的培養基接觸，達到冷卻的目的，然後採摘少許菌。從應變試管中退出接種環，迅速伸入待接種的斜試管中，在與環的斜面上輕輕地從試管底部到上端畫一條直線，不要破壞介質，不要讓環接觸管壁或噴嘴。
6）將接種環從斜管中抽出，然後用火焰燃燒噴嘴，將試管塞塞在火焰側。逐漸使接種環靠近火焰，然後燒灼。 如果接種環上的細菌較多，應先用火焰將環擦乾，然後燒灼，以免濺出未燃燒的細菌汙染環境，在接種病原菌時要多注意這一點。
2 液體培養基接種。
將少量細菌接種到肉醬蛋白腖的液體培養基中時，操作步驟與斜面接種基本相同，不同之處在於，將細菌的接種環挑入液體培養基後，應在液體表面的管內壁上輕輕摩擦，使細菌從環上脫落， 與液體介質混合，堵住試管塞子後，搖動液體，使細菌均勻分布在液體中，或用試管振盪器充分混合。
當液態培養基中接種量較大或需要定量接種時，可將無菌水或液態培養基注入應變試管中，用接種環刮掉苔蘚，然後用無菌移液管定量吸出懸浮液加入，或直接倒入液體培養基中。 如果培養物是液體培養物，可以用無菌移液管加入或直接倒入液體培養基中。 在整個接種過程中需要無菌操作。
3 穿刺接種。
用接種針挑取接種菌株（針必須筆直），將半固體培養基從培養基中心垂直刺穿，直到接近管底，但不要穿透，然後沿原穿刺線將針拔出，堵住管塞，燒灼接種針。
上述接種方法的無菌操作未根據實驗1進行描述。 測試人員應反覆練習無菌操作接種技術，直到他或她更熟練為止。
4 將接種的斜面、液體和半固體培養基置於 28-30 培養箱中，孵育 2-3 天，然後取出觀察結果。
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